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          學術交流

          johamu · Academic Exchange

          桉檸蒎相關機制研究取得重要成果并被SCI收錄

          發布時間:2018-10-08 21:45:27 瀏覽量:

          ??????? 眾所周知,以慢性阻塞性肺疾?。ê喎Q慢阻肺)為代表的慢性氣道疾病是我國最為常見、疾病負擔最為嚴重的慢性疾病之一,在我國40歲以上人群中慢阻肺的發病率高達8.2%,同時慢阻肺也是目前世界第四大致病因素[1]。氣道粘液高分泌是慢阻肺及其他慢性氣道炎癥性疾病的重要病理特征之一。

          ??????? 早在2016版GOLD指南中即強調了咳嗽和咳痰的增加與輕至重度慢阻肺患者死亡率增加相關,提示祛痰治療的重要性;《慢性氣道炎癥性疾病氣道黏液高分泌管理中國專家共識》也明確指出,祛痰治療有助于慢性氣道炎癥性疾病患者減輕氣道狹窄,避免反復感染,延緩肺功能下降。

          ????????已有研究表明桉檸蒎可改善慢阻肺患者的急性發作、緩解肺功能下降趨勢[2],為了進一步研究桉檸蒎有效治療慢阻肺的具體作用機制,北京九和藥業和中國醫科大學第一附屬醫院展開相關研究,取得了顯著成果,并發表了兩篇高質量SCI論文,分別是《Eucalyptol Protects Lungs against Bacterial Invasion through Attenuating Ciliated Cell Damage and Suppressing MUC5AC Expression》和《Treatment with eucalyptol mitigates cigarette smoke-induced lung injury through suppressing ICAM-1 gene expression》 ,分別于2018年發表在《Journal of Cellular Physiology》 和 《Bioscience Reports》 雜志上,其影響因子分別達到3.923和2.899,為臨床的實踐和應用提供了有價值的理論基礎。

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          圖1:桉檸蒎對治療慢阻肺的作用機制研究已發表的2篇SCI論文

          實驗方法:

          ???????實驗主要采用香煙煙熏12周的雄性大鼠,每天煙熏30min,2次/天,連續12周制作大鼠慢阻肺模型,將實驗分為對照組,煙熏組,桉檸蒎治療組,甘油治療組,觀察桉檸蒎對慢阻肺大鼠肺泡和纖毛結構、粘蛋白MUC5AC和細胞黏附因子ICAM-1的表達水平、細菌定植和氣道炎癥反應的作用。

          ??????? 論文《Eucalyptol Protects Lungs against Bacterial Invasion through Attenuating Ciliated Cell Damage and Suppressing MUC5AC Expression》主要針對桉檸蒎腸溶軟膠囊對煙熏大鼠MUC5AC蛋白表達抑制、纖毛結構保護及減少細菌定植作用進行評價。

          研究結果:

          1.肺組織H&E or PAS染色檢測形態學改變和氣道黏液的分泌

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          圖2:H&E or PAS染色法觀察肺組織肺泡形態學改變和粘多糖的分泌

          桉檸蒎能夠保護肺泡細胞,改善形態學損傷,有效減少酸性粘多糖分泌,

          降低黏液黏滯度[3]

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          2.電鏡觀察纖毛細胞的顯微結構改變

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          圖3:電鏡觀察纖毛細胞結構改變

          桉檸蒎治療組與煙熏組比較上皮纖毛相對完整,桉檸蒎對纖毛細胞

          具有保護作用[3]

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          3.菌落計數定量肺組織的細菌負荷

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          圖4:菌落計數定量檢測細菌負荷

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          桉檸蒎與熏煙組比較氣道內流感嗜血桿菌菌落計數明顯減少,桉檸蒎可

          明顯減少受損氣道內的細菌負荷[3]

          4.氣道內流感嗜血桿菌在植入6小時內計數,觀察細菌繁殖速度

          圖5:觀察流感嗜血桿菌在氣道內的繁殖速度

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          5.檢測支氣管肺泡灌洗液和肺組織中MUC5AC的表達水平,及MUC5AC與細菌定植的關系

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          ?圖6:檢測支氣管肺泡灌洗液中MUC5AC的表達水平

          圖7:免疫組化檢測肺組織中MUC5AC蛋白的表達水平

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          圖8:基因水平上檢測MUC5AC的表達

          圖9:MUC5AC的表達與細菌定植的關系曲線圖

          論文《Treatment with eucalyptol mitigates cigarette smoke-induced lung injury through suppressing ICAM-1 gene expression》主要針對桉檸蒎腸溶軟膠囊對煙熏大鼠ICAM-1基因表達及肺損傷的保護作用進行評價。

          研究結果:

          1、肺功能相關指標FEV0.3/FVC(%)與FRC的測定

          圖10:肺功能指標FEV0.3/FVC(%)與FRC的測定

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          2、觀察肺組織顯微結構的形態改變 ?

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          圖11:觀察肺泡結構變化及肺泡MLI、MAN的測定

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          3、細胞計數

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          圖12:測定支氣管肺泡灌洗液中總細胞、中性粒細胞及巨噬細胞的數量

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          4.檢測支氣管肺泡灌洗液細胞間黏附分子ICAM-1、炎性因子IL-6、TNF-α的水平

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          ?圖13:檢測支氣管肺泡灌洗液中細胞黏附分子ICAM-1、炎性因子IL-6、TNF-α的表達

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          5.免疫組織化學法檢測肺組織ICAM-I蛋白的表達

          圖14:免疫組化檢測肺組織中ICAM-1蛋白的表達

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          圖15:基因水平上檢測ICAM-1的表達

          ??????? 綜上,兩篇論文分別對桉檸蒎在慢阻肺及氣道黏液高分泌疾病的治療機制進行了詳細介紹,桉檸蒎可通過抑制MUC5AC的表達,保護肺泡和纖毛結構,減少細菌定植,從而增強宿主防御病原體侵入肺部的能力;并通過抑制ICAM-1基因在病變肺組織中的表達,減輕氣道阻塞,減少炎性細胞浸潤,減輕氣道炎癥,從而減輕肺部損傷。這為桉檸蒎腸溶軟膠囊在慢阻肺及其他慢性氣道炎癥疾病的臨床治療和應用提供了必要的理論基礎。

          [1] Zhong N, et al. Am J Respir Crit Care Med. 2007;176(8):753-760

          [2] 陳公平、吳李花、劉凱雄、林其昌,桉檸蒎治療老年穩定期慢阻肺的療效,中華老年醫學雜志2016年1月第35卷1期

          [3] Na Yu1, Yi-Tian Sun2, Xin-Ming Su1, Miao He3, Bing Dai1, Jian Kang1*,Eucalyptol Protects Lungs against Bacterial Invasion through Attenuating Ciliated

          Cell Damage and Suppressing MUC5AC Expression. 2017; Journal of Cellular Physiology

          [4] Na Yu1, Yi-Tian Sun2, Xin-Ming Su1, Miao He3, Bing Dai1?and Jian Kang1,Treatment with eucalyptol mitigates cigarette smoke-induced lung injury through suppressing ICAM-1 gene expression. Bioscience Reports (2018) 38

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